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噬菌体展示技术-让你一文读懂噬菌体

发表时间:2022-08-18 访问次数:776

  噬菌体展示技术是一种基于定向化技术的高通量筛选技术,它能在极大程度上定向技术在抗体多肽的改造和筛选方面的应用,实现外源肽或蛋白基因与噬菌体上特定蛋白融合表达的新技术。随着噬菌体展示技术的不断发展,其优势得到了广泛的认知,在实验室中的使用也愈发的频繁。

  那么,什么是噬菌体展示技术呢?

  就理论而言,噬菌体展示相对来说非常的简单,就是通过将外源肽段和噬菌体的衣壳蛋白融合展示与噬菌体表面,然后通过筛选及富集等一系列的技术,提取出我们所需要的蛋白产品。而且噬菌体展示技术能够实现对人和其他动物的B细胞抗体库进行体外筛选,能够很好地避开免疫和细胞融合等步骤,在极大程度上缩短了实验的周期,并且增加了其稳定性。因为噬菌体展示技术具备筛选容量大、可发酵生产、操作简单等一系列的优势,使得它在之后的使用中变得越发的广泛。

  噬菌体展示技术的优势体现在哪些方面?

  1、固相和液相噬菌体展示文库筛选经验丰富,可自动化进行噬菌体展示高通量筛选,实现快速交付;

  2、高达1010以上的天然抗体文库库容以及107以上的免疫抗体文库库容;

  3、通过先进的亲和力检测技术,可以深入地检测其生物信息,从而选择出最佳的人源框架区序列,快速且高通量地筛选出高亲和力、高产量的人源化抗体

  4、片段插入率高,可达90%以上;

  噬菌体抗体库构建:

  1、噬菌体展示技术的使用流程

  2、随机多肽/蛋白多肽核酸序列合成

  3、组织RNA抽提及cDNA制备目的基因/抗体基因克隆基因插入载体电转大肠杆菌抗体库库容及多样性检测

  抗体库筛选:

  靶分子暴露靶分子与噬菌体结合洗脱扩增得到筛选到的基因及表达产物。

  总的来说,噬菌体展示技术能够带来很多传统蛋白表达方式所无法达到的效果,而且因为其优势,使得其在生产一些蛋白的时候,能减少中间过程,降低其生产周期。随着噬菌体展示技术的不断提升,相信未来会有更多更迅速的方法产生蛋白。