噬菌体展示技术抗体发现平台

噬菌体展示抗体技术将基因型和表型统一于一体，将选择能力与扩增能力结合起来，具有强大的筛选能力，能够在体外模拟体内的抗体生成过程，可以不经杂交瘤途径，甚至不经过免疫就可以制备和生产单克隆抗体。

噬菌体展示技术的出现为全人重组抗体提供了一条简便、快捷的基因工程抗体制备路线，是全人重组抗体制备发展史上重要的转折点。

近年来，单域抗体(SdAb)的关注度也非常高，单域抗体为驼类和软骨鱼类中天然存在的仅由两条重链组成的特殊抗体，只包含一个重链可变区(VHH, Variable Domain of Heavy Chain Antibody)和两个常规的CH2与CH3区。单域抗体通过重链上的一个可变区(VHH)结合抗原，该可变区可以单独稳定地在体外存在，被称为驼类单域抗体(SdAb)或者纳米抗体(nanobody)。纳米抗体晶体宽为2.5nm，长4nm，分子量仅为传统完整抗体的1/10(约15kD)但依然具有完整的抗原识别能力，得益于纳米抗体微小的结构、完整的抗原识别能力以及噬菌体筛选技术，纳米抗体表现出高亲和力、高特异性、强穿透性和易于改造和表达等特点，并且由于可以获得抗体完整序列，纳米抗体可以通过体外重组表达高质量稳定生产，有效避免传统抗体的批次间差异问题。

纳米抗体特点

1.有更长的CDR3区(纳米抗体CDR3通常由16~24个氨基酸组成，传统单抗CDR3仅有7~12个氨基酸 )，与抗原特异性结合能力更强

2.结构简单，易于基因工程改造

3.制备简单，易于工业化放大生产

4.易于人源化

噬菌体抗体库的分类

抗体库是编码特性未知抗体的抗体基因的巨大集合(通常大于10¹⁰)。抗体库是通过噬菌体展示和其他体外选择技术来发现抗体的重要来源，其设计是成功发现抗体的关键。

随机肽库：将化学合成的随机寡核苷酸序列与噬菌体的表面蛋白基因融合，在噬菌体表面表达出各种氨基酸组合的随机序列短肽。利用噬菌体展示随机肽库可以高通量筛选各种抗原的抗原表位

免疫库：免疫库由经过免疫 ( 包括疫苗注射、微生物感染、自身免疫疾病、肿瘤等 ) 后的供体B淋巴细胞的抗体基因构建。对于特定免疫抗原的抗体淘选的效率较高，但一般仅适用于一种特异性抗体的选择，库容量要求不高，一般10⁶-10⁸的库容量就可满足需要

天然库：采用不经免疫的人或动物来源的外周血淋巴细胞、骨髓、脾细胞的B细胞作为材料，进行基因扩增，但亲和力通常较低。骨髓内和骨髓外所有抗体基因都包含在内，所构建的抗体库适用于所有抗原所对应的抗体的选择，库容量要求较高，最小需要达到10⁹，因为目前估算的自然界的抗原种类在这个数量级上

1.丰富的噬菌体抗体技术经验，5年以上噬菌体抗体开发，交付上百个噬菌体展示抗体开发项目

2.具有全人源重组抗体库，库容高达千亿级别(10¹¹ pfu)，两步建库法，保证了文库的多样性，抗体库片段插入正确率高;可以两周拿到全人源重组抗体

3.可以构建多物种(人源、小鼠、兔子、羊驼等)抗体文库

4.可以构建多种类型(scfv、Fab、VHH 等)的抗体文库

服务流程

根据文库中数百个随机抗体序列分析，其CDR3长度基本符合正态分布，跟文献中报道的自然VHH抗体CDR3长度分布相符。

挑选背景值较低的抗体蛋白进行亲和力测定，结果如下：