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单B细胞技术的工作流程是怎样的?

发表时间:2023-09-13 访问次数:268

  单B细胞技术是现阶段单克隆抗体制备的主要方法,其保留了轻重链可变区的天然配对,具备快捷、细胞数量少、高效等优势。单B细胞技术通过直接扩增单B细胞的VH和VL编码基因,从而生产出高质量的单克隆抗体。那么,单B细胞技术的具体流程是怎样的?

  1、单个B细胞分离

  从淋巴组织中分离出单B细胞,而后通过显微操作、激光捕获显微切割以及荧光激活细胞分选等技术,中挑选出具备特异性的细胞;

  2、单B细胞抗体测序及克隆

  通常我们会采用96孔板进行单细胞的cDNA合成,而后通过相应的技术手段对其进行扩增。而后将表达载体转染到哺乳动物细胞中,而后对单克隆抗体进行体外表达;

  3、抗体表达及筛选

  鉴定抗体片段的特异性和生物活性,而后将携带有目的抗体的表达载体在对应的表达载体中进行表达。

  其实大家不难看出,单B细胞技术开发和杂交瘤细胞抗体表达有着很多相似之处,只是在细胞制备最初阶段有着一定的区别,之后的过程都非常的类似。作为现阶段能够制备高质量单克隆抗体的热门方式,单B细胞技术将会得到进一步的开发,活得更好的制备方式。普健生物专业为您提供单B细胞单克隆抗体制备服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。