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哺乳动物蛋白表达瞬时转染与稳定转染之间有哪些不同?

发表时间:2023-10-25 访问次数:215

  我们在利用哺乳动物表达蛋白时,因为其能够更好的促使蛋白进行正确的折叠和修饰功能实现,所得所得蛋白更加接近天然蛋白的状态,所以,利用其制备的药品在效果方面更好。我们知道,在利用哺乳动物蛋白表达系统时,常常会通过两种方式:瞬时转染和稳定转染。那么,这两种方法有哪些方面的不同呢?

  瞬时转染和稳定转染之间有哪些不同?

  其实就操作而言,瞬时转染和稳定转染大体相同,都是将目的蛋白转染到哺乳动物体内,利用其蛋白表达过程表达目的蛋白。但是,瞬时转染并没有将目的蛋白转染到细胞染色体上,而是转染至游离的载体上,这样能够让我们在短时间内获得大量目的蛋白。这个方法只能短时间内获得蛋白,但是随着细胞的繁殖,会导致外源基因的丢失,最终无法生产目的蛋白;

  而稳定转染则是将目的蛋白转染到细胞染色体上,而后随着原细胞蛋白的表达而表达。这个方法不会造成目的基因的丢失,能够长期稳定地进行目的蛋白表达;

  瞬时转染和稳定转染在操作上存在哪些方面的不同?

  1、瞬时转染选择的质粒不需要有抗性,而稳定转染所需质粒需要有一定的抗性来进行后期的克隆株筛选;

  2、瞬时转染的操作相对简单,只要在质粒构建好后,通过细胞复苏、转染、培养、蛋白纯化等一系列的操作后即可获得目的蛋白。而稳定转染则需要构建好质粒线性化,导入细胞,而后将转染后的质粒与细胞进行融合,再通过筛选、培养等一系列的步骤后再构建相应的稳定细胞系(稳定转染可以实现长期稳定地生产蛋白);

  总的来说,我们在进行哺乳动物蛋白表达时,完全可以根据需求来进行瞬时转染或稳定转染,当短期需要蛋白时,选择瞬时转染,长期需要蛋白时,选择稳定转染。当然了,具体选择也需要结合相关成本和技术支持来选择。武汉普健生物专业为广大用户提供哺乳动物蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。