重组蛋白表达时细胞转染中的一些注意事项

　　在进行重组蛋白表达时，需要通过一定的技术手段将目的基因置入到宿主细胞内，这个过程我们称之为细胞转染。前文中我们和大家介绍过细胞转染的一些方法，比如物理介导法、生物介导法等(详情可查看“什么是细胞转染技术?盘点细胞转染的原理及其的特点”)。可以说，细胞转染成功与否直接关系到重组蛋白表达的成功。那么，细胞转染时有哪些因素会影响到因素呢?

　　1、血清

　　血清会在一定程度上影响到蛋白的表达，比如DNA阳离子脂质体复合物形成时是不能包含血清的，而且血清也曾一度被认为会降低转染效率，同时，对于那些对血清含量比较敏感的细胞，会在极大程度上影响到蛋白的表达;

　　2、抗生素

　　抗生素(青霉素、链霉素等)会在一定程度上影响到细胞转染，有一些细胞会受到抗生素的影响，需要结合具体情况来选择是否添加抗生素;

　　3、细胞状态

　　细胞转染的过程非常重要，一定不要急于求成，需要让细胞保持在最佳状态时再进行转染。一般来说，除了细胞状态外，还需要尽量保证不要用传代太多次的细胞去做;

　　4、细胞铺板密度

　　不同的细胞其最佳培养密度是各不相同的，需要结合细胞的类型以及应用而异;

　　5、启动子选择

　　想要获得高转染的活性细胞，和其所选择的启动子相关性是非常高的。比如，CMV启动子在大多数细胞类型中可以获得较高表达活性;

　　6、DNA量

　　高质量的DNA量对于高效表达可以说是至关重要的，转染的质粒无论是在纯度还是在浓度方面都有着很高的需求;

　　总的来说，影响到细胞转染效率的因素是非常多的，都需要结合实际情况来进行选择。所以，我们除了按照实验顺序进行转染，同时调整好相应的转染环境外，还需要主要好相应的细节问题。武汉普健生物专业为广大用户提供蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。