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有关鼠单克隆抗体制备的详细过程

发表时间:2022-09-28 访问次数:2486

  自从杂交瘤细胞技术被建立以来,这种既能分泌抗体,又能无限增殖的杂交融合细胞技术就得到了广泛的使用。它能大量产生同一种抗体,而且是针对同一抗原的高度同质化的抗体,这种抗体我们称之为单克隆抗体(单抗,monoclonal antibody)。下面,普健生物就和大家具体聊聊有关鼠单克隆抗体制备的详细过程。

  基本过程如下:

  1、将抗原注入小鼠体内;

  2、培养小鼠一定时间;

  3、获取小鼠脾脏,获得脾细胞;

  4、通过杂交瘤技术,将其B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞(不仅具备B细胞特性,同时可以无限增殖);

  5、筛选出优质的杂交瘤细胞;

  6、对筛选出来的杂交瘤细胞进行鉴定和克隆(也就是我们常说的杂交瘤细胞株);

  目前杂交瘤技术的使用变得越发的广泛,还有更多的潜力等待我们开发。相对于抗血清来说,能减少大量动物和费用。而且其纯度高,均一性好,更适合药物生产和临床使用。

  获得杂交瘤细胞株后,我们通常会通过如下两个方法来产生单克隆抗体。

  1、小鼠腹水。将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔内,在获得腹水的同时,可以通过纯化获得抗体。这个方法操作相对简单,花费较少,重复性高,但是伤害动物,如果需要实现大规模生产,则需要使用到大量的小鼠;

  2、细胞培养。直接培养杂交瘤,提取其上清液中的抗体。这个方法适合大规模生产,只是获得的抗体所包含的杂质较多,可能会产生一些影响到当体纯度的杂蛋白;

  如上,便是有关鼠单克隆抗体生产的全部过程,可以说,如上的方法都存在着一定的局限性,纯度高的方法对动物伤害较大,大规模生产的方法则含杂质较多。所以,我们在日常实验中,需要结合自己的实际来选择合适的方法,以满足我们单克隆抗体生产的需求。更多鼠单抗生产的知识,敬请关注普健生物。