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盘点杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体会遇到的问题

发表时间:2023-10-20 访问次数:253

  杂交瘤细胞制备抗体技术相信大家都不觉得陌生了,它就是一种将免疫后的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后产生单克隆抗体的传统方法。如果想了解杂交瘤相关的具体知识,可以点击“什么是杂交瘤测序?它的操作流程是怎样的?”查看。今天,普健生物在这里简单和大家介绍一下有关杂交瘤技术制备单克隆抗体时常见的一些问题。

  一、微生物污染

  1、细菌和真菌污染一般都是因为操作不当所导致,除了实验之前做好日常消杀外,还需要确保消毒剂的纯度及质量;

  2、支原体污染则可能是因为血清制品以及相关实验材料污染所导致,一般来说,短期污染没什么明显变化,但是时间长了之后可能会导致细胞生长缓慢。所以,在购买相关产品的时候,要尽量保证相关产品的纯度,减少不必要的麻烦;

  3、原声生物污染常见的主要为黑胶虫,污染后会出现一些小黑点;

  二、细胞不生长

  1、最常见的原因是因为融合试剂有毒,需要进行替换;

  2、使用的血清质量很差,可以优先考虑胎牛血清;

  3、添加剂比例不正常;

  三、细胞不分泌抗体

  1、细胞直接不分泌抗体一般来说主要是因为抗原免疫性差所导致,脾脏损伤严重等;

  2、后期分泌抗体越来越少主要因为骨髓瘤繁殖被抑制、克隆不及时以及染色体丢失等情况导致;

  四、细胞克隆困难

  1、对已有杂交瘤细胞进行筛选;

  2、在培养基中加入IL-6;

  其实大家不难看出,导致杂交瘤细胞制备抗体困难或失败的原因主要是因为细节方面的错误操作导致。所以,我们在日常抗体制备时,不仅要严格按照实验流程来,而且需要注意各个细节方面的问题。武汉普健生物专业为广大用户提供杂交瘤制备单克隆抗体服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。