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如何做好稳定细胞株的筛选工作?

发表时间:2022-11-15 访问次数:784

  稳定细胞株广泛应用于重组蛋白、抗体生产、检测分析等领域,因为其表达的蛋白稳定性好、批次间的差异小,所以,被广泛使用与医学领域。我们知道,在稳转株构建的过程中,会涉及到一个筛选的过程,今天我们就和大家具体聊聊有关稳定细胞株筛选方面的工作。

  如何进行稳定细胞株的筛选呢?普健生物今天在这里和大家分享两种筛选方法。

  方法一:通过将质粒整合到染色体上后,通过单克隆筛选稳定细胞株。

  1、以10天内细胞全部死亡的抗生素浓度来作为基准浓度;

  2、细胞接种,转染实验前接种的细胞,转染细胞密度达到60%-80%的细胞;

  3、转染;

  4、筛选具备抗性的细胞,并鉴定所筛选的结果;

  方法二:利用逆转录病毒筛选稳定细胞株。

  1、人源化的抗体基因转接到慢病毒载体上;

  2、使用包装细胞包装病毒;

  3、用病毒去转染目的细胞;

  4、筛选出合适的细胞株;

  其实大家也不难看出,稳定细胞株筛选的过程其实都大同小异,大体上的程序基本相同,只是在细节方面有着一定的区别,这也是细胞株构建成功与否的原因所在。普健生物专业为您构建稳定细胞株服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。