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毕赤酵母表达-如何对酵母进行保存和培养?

发表时间:2023-03-28 访问次数:1591

  毕赤酵母表达是原核表达中最常用的方法之一,因为其遗传背景清晰、表达安全、制备成本低等优点,使得在很多项目上都会优先考虑。但是,如何让这些耗材产生最大价值,那就是我们保存和培养的问题了。为什么大公司在成本上要比小公司更低?因除了因为技术和仪器方面的原因外,对耗材的保存和培养也是很大的一个方面。

  1、计算好酵母的倍增时间

  据生物学统计,酵母的生长分裂会随着一定的曲线来变化,通常一OD值来绘制。一般来说,酵母分裂曲线主要分为三个时期:延滞期、对数生长期以及稳定期,在对数期时,细胞分裂旺盛且细胞数目倍增。这个时候,我们需要主要补充营养,一旦营养耗尽,细胞分裂减缓,则会进入稳定期。所以,了解本增时间,能够很好地让我们安排实验进程;

  2、制备培养基

  了解好OD图后,我们就需要进行酵母菌的培养工作了。酵母的主要粮食是:酵母提取物(去除细胞壁的细胞成分)、蛋白胨以及糖分。培养基则是将酵母提取物和蛋白胨溶解于水中之后,通过高压灭菌后,倒入到平板中,凝固后即是我们所需的培养基;

  3、酵母的培养

  将酵母细胞种到小体积的培养基中,并在30度的摇床或旋转器上培养48小时。当然了,对于大规模培养如上的方式就不适合了,需要先确定酵母培养物的OD值,然后将其稀释到起始OD值的0.1-0.2倍,然后再放到30度摇床上培养到所要的OD值;

  4、酵母的存储

  平板培养可将培养基放置于4度环境下保存3个月,如果要得到新鲜培养物,则需要在新鲜培养基上重新规划细胞。对于需要长期保存的酵母菌来说,可将其分别培养在不同的甘油管中,冷冻保存。一般来说,-80度环境下可以保存几年;

  酵母的健康可以或直接关系到我们后期实验的结果,以及能否表达出我们想要的蛋白产品。如果这些工作做好了,不仅能更好地满足我们的实验需求,而且能够在极大程度上降低实验成本。武汉普健生物专业为广大用户提供酵母蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。

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