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蛋白的提取和纯化是同一个过程吗?

发表时间:2024-04-23 访问次数:170

  蛋白是生物体内的重要成分,它参与生物学功能中的各种角色,无论是结构支撑还是代谢调节,都有着它的身影。为了研究蛋白的特性,科学家们往往需要将所需蛋白从细胞内提取出来,其中涉及到的操作可谓多种多样。在这个过程中,也衍生出了各种专业名词。就比如蛋白提取和蛋白纯化,从字面意思上来说都是讲蛋白分离出来,但是,为什么又要用到两个词呢?今天,普健生物和大家具体聊聊。

蛋白的提取和纯化是同一个过程吗?

  蛋白提取和蛋白纯化是同一个操作吗?

  不是的。蛋白提取的主要过程是将蛋白从细胞中分离出来,最后的操作可以看做是初步的纯化操作,而蛋白纯化则是提升混合液中蛋白浓度的一种方法。想要进一步了解,我们只需要了解到蛋白的具体提取过程就行。

  蛋白提取的过程是怎样的?

  1、细胞破碎。通过机械法(超声波、搅拌等)、化学法(细胞壁酶等)方法将细胞进行破碎,使得细胞内的蛋白得以释放;

  2、离心。将破碎后的混合物进行离心,去除底部的细胞壁和细胞核,从而获得包含蛋白的上清液;

  3、沉淀。通过添加盐或是有机溶剂,使得其中的杂质得以沉淀,而后在通过离心或过滤的方式来进行收集;

  4、萃取。通过固相吸附剂等物质对所得蛋白进行富集和分离;

  蛋白纯化的过程是怎样的?

  蛋白纯化是将蛋白从蛋白提取后的溶液中分离出来的一种方法,通过这个操作,能够极大程度上提升蛋白的浓度。具体纯化方法,我们一般选择如下几种:

  1、凝胶电泳。这个方法是按照蛋白的大小、电荷等性质分离蛋白,通过凝胶电泳,将相关特性的蛋白分离出来,主要用作蛋白的分析以及预处理;

  2、柱层析。主要原理是根据蛋白分子的大小、电荷、亲和力等特性,将蛋白从杂质中分离出来的方法;

  3、亲和纯化。通过目标蛋白的特异性分析,将其与具备相关特性的配体进行亲和性结合,将目标蛋白吸附到某种固相材料上,而后再将其洗脱下来,以获得目标蛋白;

  4、超滤法。采用一些超滤技术,将小分子杂质从中过滤出去,从而获得纯度更高的蛋白;

  其实大家不难看出,蛋白提取与蛋白纯化其实就是蛋白制备中的两个步骤,进行蛋白提取之后,根据需求再进行蛋白纯化工作,以便于更好的对蛋白进行应用。蛋白制备其实是一个非常严谨且复杂的过程,需要注意好相关细节操作,才能更好的保证蛋白的表达。武汉普健生物专业为广大用户提供蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。