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盘点重组抗体表达过程中会遇到的一些问题

发表时间:2023-08-07 访问次数:398

  重组抗体表达相信大家已经耳熟能详了,通过重组抗体表达技术,能够让我们获得很多传统抗体无法实现的功能,使得疾病医治变得更加的简单。但是,对于很多人来说,重组抗体表达的成功率不高,但是又和设计以及操作没有太大关系。这是为什么呢?今天,普健生物就和大家具体聊聊重组抗体表达中的一些常见问题。

  1、重组抗体稳定性不高,如何提升?

  一般来说,很多重组抗体的稳定性都不强,我们可以通过优化洗脱条件,将高PH值逐渐降低,选择最适合的表达环境。同时,纯化的样本需要及时进行中和,如果有需求,可以选择边纯化边中和。对于纯化后的样品可以选择在合适的低温环境下保存,同时添加蛋白保护剂以降低蛋白的溶解速率;

  2、哺乳动物表达系统,是否选择CHO?

  CHO细胞的使用范围非常的广泛,但是也并不是所有的环境下都适合。我们需要结合表达需求来进行综合选择,这样才能在更大程度上保证重组蛋白的表达效率;

  3、重组抗体的载体要如何选择?

  重组抗体表达所选载体和细胞最好配对使用,如果选择的非配套的,很容易造成蛋白表达量低的情况;

  4、如何提升重组抗体的表达量?

  其实就是表达系统和方法的选择,尽量选择表达量高的系统,表达细胞一定要选择状态好活性强的细胞,如果时间允许,还需要对表达进行优化,延长表达时间,以便于获得质量更好的抗体;

  5、有关抗体活性方面的判断。

  一般来说,真核表达系统所表达的抗体活性要强过原核表达,不过不同的抗体其稳定性不同,具体需要结合实际需求来选择;

  6、重组抗体的表达量可否通过高通量筛选来实现?

  答案是肯定的,采用高通量抗体表达系统和筛选,能够有效提升抗体的表达量,当然了,其中的费用投入相对来说也要高一些,所以,我们需要结合实际情况来进行选择;

  总的来说,重组抗体表达过程中需要注意的事项有很多,一些细节方面的操作也能在极大程度上制约着抗体的表达量。所以,在日常使用中,我们需要严格按照是按步骤来进行相关操作,这样才能在更大程度上保证重组抗体的表达量。普健生物专业为广大用户提供重组抗体表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。