羊源重组抗体开发_普健生物（武汉）科技有限公司

服务简介

AtaGenix 自主构建的 Caprines-Native-scFv 天然噬菌体展示抗体库，来源于不同品种的山羊和绵羊（山羊：波尔山羊 + 本地品种；绵羊：小尾寒羊 + 杜泊羊），总库容量达 3.101×10¹⁰ cfu，插入正确率 98.0%。多品种供体有助于扩大免疫组库的序列多样性。

山羊和绵羊分别构建为独立子库，使用方式灵活：客户可选择 双库混合淘选（同时覆盖两个物种的序列多样性），也可 指定单物种子库（仅山羊或仅绵羊）进行淘选，无任何限制。无需针对目标抗原进行动物免疫，即可快速筛选获得特异性羊源重组抗体候选分子。

山羊和绵羊与人、鼠、兔等常见抗体宿主存在较大的系统发育距离，有机会获得与常用鼠源、兔源抗体不同的表位识别谱，拓展部分保守靶标的抗体发现空间。羊源抗体在以下场景中具有独特优势：

多重免疫染色 — 便于与鼠源、兔源抗体组成多宿主一抗体系，降低二抗识别冲突并拓展多重染色组合
夹心 ELISA 及诊断开发 — 可与不同物种来源抗体构建更多配对组合，为非竞争表位筛选提供更多候选
保守靶标及不适宜动物免疫的抗原 — 无需针对目标抗原进行动物免疫，为高保守性、潜在毒性或其他不适宜常规免疫的靶标提供另一种抗体发现路径

服务优势

优势	说明
双物种、大库容	山羊 + 绵羊（4 个品种）独立建库，总容量 310 亿（3.101×10¹⁰ cfu）。支持双库混合淘选或指定单物种子库淘选，客户按需选择
无需免疫、周期短	天然库直接淘选，无需针对目标抗原进行动物免疫，从抗原到候选抗体交付最快 6–8 周
差异化表位识别	羊与人/鼠/兔亲缘关系远，有机会获得与鼠源、兔源抗体不同的表位识别谱，拓展保守靶标及难免疫抗原的抗体发现空间
高 QC 标准	插入正确率 ≥97.5%，测序正确率＞85%。NGS 分析显示 Goat-LH 子库覆盖多个主要轻链和重链 V 基因家族，CDR3 长度呈集中且连续的分布
灵活输出格式	筛选获得 scFv 后，可根据下游需求转化为 scFv-Fc 融合蛋白或完整 IgG 分子，并采用相应纯化策略（scFv 通过亲和标签纯化，scFv-Fc/IgG 通过 Protein A/G 纯化）
一站式交付	抗原设计 → 库淘选 → 序列鉴定 → 重组表达 → 功能验证，保证交付 ≥3 株经 ELISA 验证的阳性重组抗体克隆（含纯化蛋白、完整序列、验证报告）

服务内容

抗体库核心参数

子库	品种来源	库容量 (cfu)	插入率	插入正确率	测序正确率
Goat-LH（2026）	波尔山羊本地品种	1.132×10¹⁰	100%	98.6%	＞85%
Sheep-LH（2026）	小尾寒羊杜泊羊	1.969×10¹⁰	99.6%	97.5%	＞85%
合计	多品种	3.101×10¹⁰	—	98.0%	＞85%

种系基因（Germline）多样性分析

NGS 分析显示，Goat-LH 子库覆盖多个主要轻链和重链 V 基因家族，包括轻链 IGKV1/2、IGLV1/2/3/8，重链以 IGHV1S1（62%）为主导，同时包含 IGHV1S2/S3/S4/S6/S9 等家族。

Goat germline gene distribution

图1. 种系基因（Germline）分布 — 左：轻链（IGKV/IGLV），右：重链（IGHV）

CDR3 长度分布

CDR3 是决定抗体结合特异性的关键区域。库内重链 VH-CDR3 长度集中在 12–17 个氨基酸（峰值 15aa），轻链 VL-CDR3 集中在 9–11aa（峰值 10aa），整体呈集中且连续的长度分布，未见明显异常单一长度偏倚。

CDR3 length distribution

图2. CDR3 长度分布 — 左：VH-CDR3（重链），右：VL-CDR3（轻链），橙色标注峰值

服务流程

步骤	环节	说明	周期
1	靶标抗原准备	客户提供纯化抗原（推荐 ≥0.5 mg，纯度 ≥90%），或由 AtaGenix 代为表达纯化	1–2 周
2	噬菌体淘选	Caprines-Native-scFv 库与靶标进行 3–4 轮亲和淘选，逐步富集特异性克隆	2–3 周
3	单克隆鉴定与测序	Phage ELISA 筛选阳性克隆，Sanger 测序获得完整 scFv 序列及 VH、VL 可变区序列	1–2 周
4	重组表达与纯化	候选 scFv 序列可根据下游应用需求转换为 scFv、scFv-Fc 或完整 IgG 格式，并采用相应表达与纯化策略。scFv 可通过亲和标签进行纯化；scFv-Fc 或完整 IgG 可采用 Protein A/G 等亲和纯化方式。哺乳动物表达可选择 HEK293 或 CHO 系统	1–2 周
5	功能验证	ELISA（结合活性）、Western Blot（特异性）、Flow Cytometry（可选）	1 周

* 标准项目周期 6–8 周（不含抗原制备）。保证交付 ≥3 株经 ELISA 验证的阳性重组抗体克隆，含纯化蛋白（≥0.2 mg/株）、完整 scFv 及 VH/VL 可变区序列、验证报告。

案例展示

已验证靶标

我们已利用 Caprines-Native-scFv 抗体库成功筛选出多个靶标的羊源重组单克隆抗体，并通过 ELISA 结合活性和 Western Blot 特异性双重验证：

靶标	分子量	验证应用	筛选克隆编号
GlmM	41.98 kDa	ELISA Binding + WB	R3P1-A4 / A5 / A11
Human B3GNT6	37.37 kDa	ELISA Binding + WB	R2-4P1-A4
Human CLEC7A (Dectin-1/CD369)	16.71 kDa	ELISA Binding + WB	R4P1-C11 / H1

注：以上为平台验证数据。ELISA EC50 反映结合活性趋势，不等同于亲和力常数（K_D）。阳性率因靶标而异。

案例 1：GlmM（磷酸葡萄糖胺变位酶）— 41.98 kDa

筛选获得 3 株阳性克隆（R3P1-A4 / A5 / A11），EC50 范围 91.6–215.3 ng/mL，WB 在预期分子量处检出单一特异条带。

GlmM ELISA binding + WB

案例 2：Human B3GNT6 — 37.37 kDa

筛选获得 1 株阳性克隆（R2-4P1-A4），EC50 = 2,002 ng/mL，WB 在 ~37 kDa 处检出特异条带。

B3GNT6 ELISA binding + WB

案例 3：Human CLEC7A（Dectin-1/CD369）— 16.71 kDa

筛选获得 2 株阳性克隆（R4P1-C11 / R4P1-H1），EC50 = 1,261–1,480 ng/mL，WB 在 ~17 kDa 处检出清晰特异条带。

CD369 ELISA binding + WB