家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是蚕业中的重要病原体,因其对家蚕健康的严重影响导致巨大的经济损失。研究表明,该病毒通过调控宿主氨基酸代谢支持其复制,其中精氨酸是病毒增殖的关键氨基酸。BmNPV通过上调氨基酸转运体Slc7a6增强精氨酸摄取,并诱导线粒体自噬以维持细胞内氨基酸水平,从而促进病毒复制。
相关研究发表于PLOS Pathogens,2025年7月8日,DOI: 10.1371/journal.ppat.1013331。
研究团队旨在探索BmNPV如何在家蚕细胞中重编程氨基酸代谢,具体需求包括:验证Slc7a6在精氨酸摄取及BmNPV复制中的作用;评估自噬在氨基酸稳态中的贡献;以及在家蚕和BmN细胞模型中研究精氨酸代谢对病毒增殖的影响。需要高特异性的ATG8抗体用于检测自噬标志物,确保免疫荧光和Western Blot实验的准确性。
ATG8抗体的制备需确保高特异性和稳定性,以准确检测BmNPV感染诱导的自噬标志物;抗体需兼容多种实验平台(如IF、WB),并避免非特异性信号;此外,敲除Slc7a6并评估其对病毒复制的影响需要高效的基因编辑技术和可靠的检测方法。
- 抗体开发策略:AtaGenix采用新西兰兔免疫制备ATG8多克隆抗体,优化免疫原序列以提高特异性,通过Protein A/G亲和纯化,确保抗体纯度>90%。
- 实验流程:通过优化的免疫方案和亲和纯化流程,制备高特异性ATG8抗体,ELISA效价>1:64000,适配免疫荧光(IF)和Western Blot(WB)实验。
- 验证手段:通过激光共聚焦显微镜和Fiji软件分析BmNPV感染诱导的线粒体自噬,验证ATG8抗体在检测自噬标志物中的特异性;结合qPCR和TCID50检测,确认BmNPV病毒基因(vp39)表达和病毒滴度的变化。
- 附加支持:AtaGenix提供详细的抗体质控报告(包括SDS-PAGE、ELISA效价和批次一致性数据),推荐抗体应用场景(如IF染色条件、WB稀释比例)。
AtaGenix提供的高特异性ATG8多克隆抗体在家蚕BmNPV感染研究中发挥了关键作用。研究通过抗体验证了BmNPV诱导的线粒体自噬,证实病毒通过自噬维持氨基酸稳态以支持复制。抗体的高特异性和稳定性确保了实验结果的可靠性,助力团队揭示BmNPV通过“外源摄取-内源供应”模型调控精氨酸代谢的机制,为开发针对BmNPV的抗病毒策略提供了新视角,具有重要的农业应用潜力。
BmNPV感染诱导的线粒体自噬
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