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关于真核蛋白表达系统您了解多少?

发表时间:2024-04-22 访问次数:181

  真核蛋白表达技术是是一种在生物药品制备以及生物研究领域有着广泛使用的蛋白技术,通过将外源基因转染之真核细胞中,使得目标蛋白得以表达。相比原核表达系统来说,真核蛋白表达系统能够更好地进行折叠以及翻译后修饰工作,更适合于表达那些功能性更强的蛋白。

关于真核蛋白表达系统您了解多少?

  真核蛋白表达的原理:

  真核蛋白表达的原理是通过技术手段将外源基因导入到真核细胞内,利用宿主细胞的生物机制合成目标蛋白的过程。通过基因克隆、转染、转录后翻译、翻译后修饰、蛋白纯化、蛋白分析等一系列的手段来实现蛋白表达;

  真核蛋白表达的流程:

  1、基因克隆。将目标基因克隆到真核表达载体中,当然了,根据需求进行启动子、标记以及调控元件等元件的选择;

  2、细胞培养。将所得载体转染到真核细胞中,而后再通过细胞培养,使得其具备蛋白表达的能力;

  3、细胞筛选。从所得细胞中筛选出能够正常表达目标蛋白的细胞,并通过细胞裂解来获得目的蛋白;

  4、蛋白纯化。通过层析、透析、离心、沉淀等一系列的手段提升目的蛋白的纯度;

  常用的真核蛋白表达方法:

  1、哺乳动物表达系统。采用哺乳动物细胞为载体表达蛋白,适合大规模表达复杂蛋白;

  2、昆虫杆状病毒表达系统。采用杆状病毒携带目的基因转染昆虫细胞的方式来表达蛋白,适合一些较为简单的真核蛋白表达,具备制备成本低、操作简单等方式;

  3、酵母表达系统。采用酵母细菌表达目标蛋白的方式,适合于表达一些中等规模的蛋白,对于那些较大规模以及高密度表达的蛋白;

  综上所述,我们需要结合蛋白的性质和需求来选择合适的蛋白表达系统,通过对培养条件、转染条件等方式来提升蛋白的表达效率。当然了,我们在进行蛋白表达过程中,需要选择合适的蛋白纯化方法,避免对蛋白造成影响。普健生物专业为广大用户提供真核蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。