首页 / 资料下载 / 知识百科

重组蛋白表达之细胞转染的原理及问题解析

发表时间:2024-05-10 访问次数:189

  在重组蛋白表达时,我们常常通过将外源基因导入到细胞内,让其随着细胞蛋白的表达而表达,从而获得目标蛋白的方式。这个过程,我们称之为细胞转染。细胞转染的实现过程有很多,比如化学转染法、物理转染法、生物转染法等等。可以说,细胞转染是实现基因编辑、蛋白表达、信号传导等一系列研究的重要方法。

重组蛋白表达

  细胞转染现阶段主要有两种:稳定转染和瞬时转染(关于稳定转染和瞬时转染的相关知识以及稳定细胞株构建的步骤,大家可以点击“哺乳动物蛋白表达瞬时转染与稳定转染之间有哪些不同?”查看)。

  细胞转染的常见问题有哪些?

  1、哪些因素会影响到细胞的转染率

  质粒。质粒的选择从直接上关系到转染的效率,其浓度也会在极大程度上影响着转染的效率(一般不要低于1000ng/uL);

  细胞。首先要保证所选是一个活性较高的细胞,对于不同的细胞来说,转染方法和试剂的选择不同,转染的效率也会存在极大的差异;

  方法。按照说明书来选择合适的转染方法,并确定好最佳的转染条件;

  2、细胞转染无法提高转染率要怎么解决

  当出现细胞转染效率低的情况时,可以选通过构建稳定细胞株的方式,或者通过药物的加压筛选来进行,这样一般都能解决转染效率低的情况;

  3、怎么选择合适的细胞转染

  目前常用的转染方法主要有物理转染法以及化学试剂等转染方法,但是也各具优缺点。比如物理转染法需要使用到一些昂贵的仪器,一般的实验室无法满足这些要求;而化学转染法使用相对更加广泛,价格便宜、操作简单,但是只能用于一些较为常规的细胞,对于一些个性化的细胞转染效率则会相对低下;

  细胞转染作为外源基因的引入方式,可以说在直接上关系着蛋白表达的效率或成功率,可以说是蛋白表达成功的第一步。所以,如何选择载体并构建好合适的转染环境,在极大程度上制约着蛋白的表达。武汉普健生物专业为广大用户提供蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。