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纳米抗体开发案例

发表时间:2023-06-25 访问次数:1982

纳米抗体(Nanobody,Nb),即重链单域抗体VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody) ,无轻链及CH1区,主要优点是分子小、稳定性高、免疫原性低、易于人源化、易于连接,并可通过多种途径进行给药。此外,在分子设计时可选择加入与人血白蛋白结合的功能区,将半衰期延长至2-3周,并且可以通过白蛋白将药物运输至靶位点。这些特点使得VHH在基础研究、诊断及治疗上具有极大的应用价值。

普健生物可提供羊驼免疫,纳米抗体VHH噬菌体建库及淘选技术服务,更有千亿级VHH纳米抗体天然噬菌体文库可淘选各类靶点抗原,大大缩短药物开发周期。

案例展示

免疫文库构建-效价检测

血清稀释倍数 未免血清 一兔 二兔 三兔 四兔
10 0.891 2.916 2.917 2.845 2.772
100 0.108 1.591 2.655 2.838 2.688
1000 0.046 0.46 2.316 2.474 2.686
10000 0.013 0.33 0.619 1.038 0.954
100000 0.009 0.31 0.119 0.171 0.148
1000000 0.008 0.027 0.053 0.041 0.037
10000000 0.008 0.015 0.021 0.008 0.024
PBS 0.009 0.015 0.011 0.004 0.008

 

免疫文库构建-总RNA和VHH鉴定

免疫文库构建

免疫文库构建-文库质检

免疫文库构建

菌落PCR鉴定结果

多克隆ELASA验证

多克隆ELISA验证

多克隆ELISA验证结果

第一轮单克隆ELISA验证

单克隆ELISA验证

第一轮单克隆ELISA验证结果

第二轮单克隆ELISA验证

单克隆ELISA验证

第二轮单克隆ELISA验证结果

验证纳米抗体与抗原结合

纳米抗体与抗原结合

ELISA验证重组纳米抗体与抗原结果

亲和力测定

重组纳米抗体与抗原亲和力测定

重组纳米抗体与抗原亲和力测定

重组纳米抗体与抗原亲和力测定结果