每月研报：盘点普健生物2026年3月文献锦集

结直肠癌（CRC）易复发且免疫微环境抑制抗肿瘤免疫，现有治疗效果有限。研究发现METTL3的K513位点二甲基化与CRC进展和复发相关，SETD1A可催化该位点甲基化，增强METTL3与SAM的结合及RNA的m⁶A修饰，进而抑制内源性逆转录元件（EREs）表达，阻碍 I 型干扰素应答，促进肿瘤免疫逃逸。氟尿嘧啶可诱导E2F4自我调控，激活SETD1A介导的METTL3甲基化。靶向E2F4/SETD1A/METTL3轴或阻断METTL3 K513甲基化，能恢复抗肿瘤免疫，与免疫检查点抑制剂联用可显著抑制肿瘤生长。该研究揭示了CRC免疫逃逸的新机制，为CRC治疗提供了新靶点和策略。

AtaGenix为研究定制了METTL3 K513me2兔多克隆抗体。特异性检测METTL3蛋白K513位点的二甲基化状态，为验证METTL3 K513甲基化与CRC进展、复发的关联提供了直接检测手段，支撑了SETD1A催化该位点甲基化、METTL3甲基化调控下游信号通路等核心结论的验证。

树突状细胞（DCs）的免疫抑制转录调控机制尚未明确，而CCR7⁺常规树突状细胞（cDCs）在免疫耐受中具有重要作用。本研究发现ETS同源因子（EHF）是调控cDCs成熟和免疫抑制的关键转录因子。EHF缺失的小鼠对自身免疫病、感染及肿瘤的抵抗力增强，EHF缺陷型cDCs在体内外均能促进Th1和Th17型CD4⁺辅助性T细胞应答。EHF可被TLR7/8/9激活，被TLR3、GM-CSF和IFNγ抑制，且直接调控Ccr7、Cd200、Cd274、Irf4和Rel等基因的转录，促进CCR7、CD200和PD-L1表达，抑制IRF4表达。此外，EHF在人和小鼠的CCR7高表达DCs中高度富集。该研究揭示了保守的cDCs免疫抑制转录程序，为自身免疫病、癌症和感染性疾病的治疗提供了新靶点。

AtaGenix在研究中提供了抗EHF单克隆抗体，特异性识别EHF蛋白，为CUT&TAG分析提供了特异性探针，直接支撑了EHF对目标基因转录调控的机制验证，明确了EHF与Ccr7、Cd200等基因的直接结合关系。同时，该抗体通过Western blotting等实验验证了EHF在不同组织及细胞中的表达特征，确保了EHF表达模式及功能研究结果的可靠性。

中心体需在G2/M期成熟以保障双极纺锤体组装和染色体分离，PLK1是该过程关键激酶，但细胞周期如何调控其适时募集仍不明确。本研究发现，泛素E3连接酶RNF40定位于中心体，G2/M期被CDK1磷酸化（T529/T557位点），进而结合PLK1并促进其募集，形成CDK1-RNF40-PLK1级联调控机制。RNF40在分裂间期被PCAF乙酰化（K517/K562位点），G2晚期至M期发生乙酰化向磷酸化的转变，该转换是级联激活的前提。持续乙酰化或磷酸化缺陷会破坏PLK1定位、微管成核及双极纺锤体组装，导致有丝分裂灾难。此外，RNF40异常与结直肠癌相关，靶向该级联或可提升化疗效果。该研究揭示了中心体成熟的细胞周期调控新机制，为肿瘤治疗提供了新靶点。

AtaGenix为本研究制备了4种特异性抗体，分别是抗-pT529-RNF40、抗-pT557-RNF40、抗-acK517-RNF40和抗-acK562-RNF40兔多克隆抗体，精准检测RNF40特定位点的磷酸化或乙酰化修饰状态，为验证RNF40的修饰特征提供了直接证据。确保了RNF40修饰位点、修饰时序及功能相关性等核心数据的可靠性，是阐明CDK1-RNF40-PLK1级联调控机制及RNF40修饰转换生物学意义的重要基础。

PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂临床应用受响应率低和免疫相关不良事件限制，肿瘤微环境中髓系细胞PD-L1调控机制尚不明确。该研究发现肿瘤分泌的HE4可直接结合髓系细胞的IFN-γR，激活JAK-STAT3信号通路，转录上调PD-L1表达，抑制CD8+T细胞功能并促进肿瘤免疫逃逸；HE4与IFN-γ竞争性结合IFN-γR，且肿瘤微环境中高浓度HE4可拮抗IFN-γ介导的STAT1活化。研发的抗HE4单克隆抗体能显著降低髓系细胞PD-L1表达，恢复CD8+T细胞活性，在多种肿瘤模型中抑制肿瘤生长，且免疫相关不良事件远少于PD-1抑制剂；临床数据显示HE4高表达可预测肺腺癌患者对PD-1抑制剂的响应，是潜在的治疗靶点和预测生物标志物。

AtaGenix为该研究制备了大鼠抗小鼠HE4单克隆抗体和小鼠抗人HE4单克隆抗体，通过其筛选出能特异性阻断HE4诱导PD-L1上调的抗体克隆，验证了HE4在PD-L1调控中的关键作用；同时借助该抗体开展体内外抑瘤实验，证实HE4中和可逆转肿瘤免疫抑制微环境，也是评估HE4阻断疗法安全性和有效性的核心试剂。

子宫内膜癌早期筛查缺乏高效便携手段，传统检测方法存在成本高、耗时久等问题，场效应晶体管（FET）生物传感器虽具潜力，但受探针不稳定、非特异性吸附及德拜屏蔽等限制难以临床转化。为此，研究团队开发出SNAP-FET平台，结合基因密码扩展与点击化学实现纳米抗体的定点定向固定，搭配氧化铟换能器，还整合出便携式设备ENDOCARE。在细胞、动物模型及临床样本中均表现出超高灵敏度、特异性和稳定性，与ELISA结果高度契合，对18例内膜癌患者和11名健康者检测的ROC曲线AUC分别达0.8434（HE4）和0.8131（CA125）。该研究为FET生物传感器的临床转化提供了新策略，也为肿瘤早期床旁诊断奠定了技术基础。

AtaGenix在研究中承接了CA125纳米抗体噬菌体展示文库的构建与筛选工作。其构建的天然VHH噬菌体展示文库（1.51×10¹⁰集落形成单位）是筛选CA125特异性纳米抗体的核心基础，经三轮淘选和单克隆筛选，成功获得高亲和力的CA125靶向纳米抗体NT2，成为SNAP-FET平台检测CA125的关键识别元件，实现了该平台对子宫内膜癌两种核心标志物的多重检测，为验证该定点修饰方法的通用性提供了重要探针，是研究能证明SNAP-FET普适性的关键环节。

再生研究是全球前沿科学议题，海参作为棘皮动物中再生能力极强的代表，内脏切除后能快速再生体腔细胞，但相关恢复机制尚未明确。本研究以刺参为对象，采用单细胞RNA测序技术，对体腔和水管系统的体腔细胞进行分析，鉴定出19个亚群。结果显示，内脏切除后，体腔和水管系统中的10号亚群细胞比例分别提升15倍和 10倍，该亚群具有增殖特性，体腔中的10号亚群可直接分化为0、4、5号亚群，水管系统中的10号亚群需经去分化后分化为9号亚群（免疫相关细胞），且Rplp0和piwi基因在其中发挥关键调控作用。研究为海参体腔细胞的分子分类提供了全面资源，揭示了内脏切除后体腔细胞的组成动态与功能变化。

AtaGenix在实验中提供了NLRC3的一抗制备服务。由于NLRC3作为9号亚群的标志基因，缺乏合适的序列用于自主制备抗体，AtaGenix针对其高度保守区域合成肽段并制备了特异性一抗。该抗体在免疫细胞化学染色中，成功明确了9号亚群细胞的形态特征（直径5-6μm、球形、中等核质比，阳性信号以大颗粒形式存在于细胞质中），为验证9号亚群的免疫功能属性、明确其与10号亚群的分化关系提供了关键的实验依据。